Uso de árboles forrajeros para el control de protozoarios ruminales
M Rosales*, M Laredo**,
Aurora Cuesta**, H Anzola** y Liliana Hernández**
*Fundación CIPAV, AA 20591, Cali, Colombia
**ICA, Tibaitatá, AA 151123, Bogotá, Colombia
[Trabajo realizado con el apoyo de la
Fundación Internacional de Ciencia; Reseearch Grant Agreement
No. B/1441-1]
Summary
To take advantage of the increases in productivity brought
about by defaunation in ruminants fed diets rich in soluble
sugars and/or alkali-treated straws, a simple and economical
method is needed to remove rumen protozoa. This experiment aimed
to provide preliminary data as to the efficacy of tropical tree
foliages, on the basis of their known content of phenolic
substances, as a means of reducing rumen protozoal numbers.
Three weaned calves (about 150 kg liveweight) were grazed on
Kikuyu pasture and received for three days, at 8 am, 400 g/day of
a 50/50 mixture of rice oil polishings and sun-dried foliage
(leaves and pecioles; mean N content about 3.5% in dry matter)
from each of the following trees (Trichantera gigantea, Erythrina
poeppigiana and Enterolobium ciclocarpum). None of the
foliages reduced protozoal numbers, which were relatively low
(1-2 x105/ml) in all animals throughout the trial.
This may partly explain the lack of effect.
Key words: Cattle, grazing, Brachiaria, melote, molasses,
phenolics, protozarios, fungi, digestibility.
Resumen
Para poder aprovechar los aumentos en la productividad, que
resultan cuando se elimina los protozoarios del rumen de ganado
consumiendo dietas ricas en azúcares ó tamos tratados con
álcalis, se necesita un método sencillo y eficaz para eliminar
a los protozoarios ruminales. El fin de este trabajo es
proporcionar información preliminar sobre la eficacia de los
follajes de tres árboles forrajeros, que contienen sustancias
fenólicas en sus hojas; como instrumento para reducir la
población ruminal de protozoarios.
Tres novillos de 150 kg peso vivo aproximadamente, con
cánulas permanentes en el rumen, los cuales pastoreaban en un
potrero de Kikuyo (Pennisetum clandestinum), recibieron
diariamente durante tres días a las 8 am, una mezcla de 200 g de
harina de arroz y 200 g de follaje seca (hojas y peciolos)
procedente de los árboles Nacedero (Trichantera gigantea),
Cachimbo (Erythrina poeppigiana) y Orejero (Enterolobium
ciclocarpum). Se tomaron muestras de líquido ruminal a las
11 am un día antes, durante los tres días del suministro de los
follajes, y por los 12 días siguientes, para conteo de
protozoarios y medición de pH y amioniaco. No hubo efectos de
los follajes sobre el conteo de protozoarios, el cual era
bastante bajo (1-2 x 105/ml) durante todo el muestreo.
Palabras claves: Protozoarios, novillos, follajes,
sustancias fenólicas, defaunación.
Introducción
Hay mucha evidencia que comprueba que en dietas de bajo nivel
proteico, y/o altos niveles de azúcares o tamos de cereales
tratados con álcalis; el reducir la población de protozoarios
en el rumen de ovejas y bovinos, conlleva a un aumento de la
productividad animal (Demeyer et al 1982; Bird 1988). Sin
embargo, la aplicación en la práctica de estos hallazgos se
hace difícil debido a la ausencia de un método sencillo y
eficaz para controlar estos microorganismos.
La hipótesis que se pretendía averiguar en este trabajo era
que las sustancias fenólicas, presentes en muchos de los
árboles forrajeros del trópico, pudieran actuar como agentes
para controlar las poblaciones de protozoarios en los rumiantes
(Leng R A, comunicación personal).
Materiales y métodos forrajes
Se utilizaron las hojas de 3 árboles forrajeros que han sido
usados tradicionalmente como suplementos en dietas basadas en
caña de azúcar y otros recursos alimenticios tropicales (CIPAV
1987). Estos fueron: Nacedero, Trichantera gigantea;
Cachimbo, Erythrina poeppigiana; y Orejero
Enterolobium ciclocarpum. Se cosecharon hojas con pecíolos
de los tres árboles, se secaron en un secador solar y se
molieron en un molino de martillos con una criba de 2 mm.
Tratamientos
Se utilizaron 3 novillos de raza Holstein de aproximadamente
150 kg con canulas permanentes en el rumen. Permanecieron durante
el ensayo en una pradera de pasto Kikuyo (Pennisteum
clandestinum). Los animales recibieron una mezcla de 200
g/día de harina de arroz y la harina de uno de los follajes
experimentales, según el siguiente plan:
Animal 1: 250 g/día de harina de hojas de Orejero
Animal 2: 200 g/día de harina de Nacedero
Animal 3: 200 g/día de harina de Cachimbo
Este suplemento se dió durante 3 días a las 8 a.m..
Mediciones:
Para los 3 días en los cuales se suministró el suplemento, y
para los siguientes 12 días, se tomaron muestras de líquido
ruminal a las 11 a.m.
Número de protozoarios
Se midió el número de protozoarios en el líquido ruminal
siguiendo la siguiente metodologia:
La muestra de líquido ruminal se filtró con una tela y se
diluyó en una solución de Formol salino en proporción de 1
parte de líquido ruminal y 4 de Formol salino (Formol al 37% y
solución salina 0.9% (Suero fisiológico) en proporción de
1:9). El Formol mata los protozoarios y la solución salina
previene la lisis.
Se sacó 1 ml de esta solución y se le adicionó 9 ml de agua
destilada y se centrifugó a 2000 rpm durante 20 minutos. Se
separó el sedimento y se le añadió 1 ml de sulfato de zinc al
40%. Esto sirve para limpiar la muestra. Después se decantaron
los protozoarios. Se volvió a centrifugar y se le adicionó al
sedimento 0.2 ml de lugol para pigmentar los protozoarios.
Los protozoarios se contaron en 10 cuadros al azar en una
cámara Chamber, que es mejor que la cámara de Neubauer, pues
tiene mayor profundidad (0.2 mm) y mayor número de cuadrículas
y de esta forma se puede contar un mayor número de protozoos
reduciendo con esto la probabilidad de error.
A los resultados finales se le adicionaron el 20% de pérdidas
de fauna debido a la centrifugación. Este factor se había
calculado anteriormente, con base de comparaciones entre muestras
centrifugadas y sin centrifugar.
Se determinaron las proporciones de los diferentes géneros de
protozoarios.
Conteo de bacterias
Del sobrenadante que quedó después de la primera
centrifugación se sacaron 0.2 ml y se le adicionó 0.2 ml de
Lugol. Se realizó el conteo en una cámara "Neubauer"
con profundidad de 0.1 mm.
Se corrigió el conteo, suponiendo la misma perdida de 20%
debido a la centrifugación.
Análisis químicos en el líquido ruminal:
Se midió el pH mediante un potenciómetro y la concentración
de amoníaco por el método de destilación al vapor.
Resultados y discusión
| Cuadro 1:
Número de protozoos (x10-5/ml) encontrados en el rumen, en animales
consumiendo una dieta básica de Kikuyo y suplementados
con follaje seco de tres árboles |
 |
| Días |
Orejero |
Cachimbo |
Nacedero |
|
| 0 |
1.2 |
1.8 |
1.6 |
| 1 |
1.4 |
3.2 |
1.8 |
| 2 |
1.4 |
1.3 |
2.5 |
| 3 |
1.2 |
1.2 |
2.0 |
| 4 |
1.4 |
0.6 |
1.0 |
| 5 |
0.9 |
1.0 |
1.4 |
| 6 |
1.9 |
0.5 |
0.4 |
| 7 |
1.6 |
1.6 |
0.9 |
| 8 |
1.2 |
1.3 |
1.1 |
| 9 |
1.5 |
1.2 |
1.1 |
| 10 |
1.6 |
2.0 |
1.6 |
| 11 |
1.4 |
1.6 |
2.8 |
| 12 |
0.9 |
1.6 |
2.5 |
| 13 |
0.7 |
1.7 |
4.1 |
| 14 |
1.3 |
2.7 |
3.9 |
| 15 |
1.2 |
1.4 |
2.4 |
| |
|
|
|
| Promedio |
1.28 |
1.54 |
1.94 |
| Desviación
Estandar |
±0.29 |
±0.68 |
±1.04 |
|
Error estandar del promedio ±0.18 (P = 0.04)
Los conteos de protozoarios (Cuadro 1) no revelaron tendencias
significativas durante el período del muestreo (r = 0.53, -0.29
y -0.13 , para nacedero, orejero y cachimbo, respectivamente) lo
que sugiere que los follajes no tenían efecto defaunador, o que
la cantidad suministrada no fué suficiente. Otro factor que
pudiera haber influido fueron las bajas poblaciones de
protozoarios que resultaron debido a la dieta usada.
Debido a la poca cantidad de follajes disponibles para el
ensayo, no fué posible hacer comparaciones eliminado el efecto
animal, y este quedó confundido el efecto del tipo de follaje.
Conteo de bacterias
| Cuadro 2:
Número de bacterias (# de Bacterias 109/ml)en el líquido ruminal |
|
| Días |
Cachimbo |
Orejero |
Nacedero |
|
| 0 |
2.50 |
3.20 |
3.20 |
| 1 |
2.00 |
2.50 |
1.90 |
| 2 |
1.30 |
2.50 |
1.80 |
| 3 |
2.10 |
2.70 |
1.50 |
| 4 |
1.40 |
2.30 |
2.20 |
| 5 |
1.20 |
2.30 |
2.70 |
| 6 |
1.50 |
1.60 |
2.40 |
| 7 |
2.50 |
2.00 |
1.70 |
| 8 |
1.40 |
1.60 |
2.20 |
| 9 |
1.20 |
2.10 |
1.80 |
| 10 |
2.00 |
2.00 |
1.70 |
| 11 |
2.20 |
2.30 |
2.00 |
| 12 |
1.80 |
1.40 |
2.20 |
| 13 |
1.30 |
1.30 |
2.80 |
| 14 |
1.00 |
1.50 |
2.60 |
| 15 |
0.80 |
1.40 |
1.40 |
| |
|
|
|
| Promedio |
1.63 |
1.96 |
2.13 |
| Desviación
estandar |
0.526 |
0.62 |
0.504 |
|
El conteo de bacterias en el líquido ruminal durante el
ensayo se presenta en el Cuadro 2. El conteo de bacterias fue
más alto en el animal que recibía el follaje de nacedero y más
bajo en el animal que recibió cachimbo. Sin embargo, estos
efectos no se pueden atribuir a los follajes por las razones ya
expuestas. Hubo una reducción (r = -0.84) en el conteo de
bacterias durante el período del muestreo en el animal
recibiendo el follaje de orejero. Una tendencia similar (r =
-0.46) se notó en el animal al cual se suminstró el cachimbo.
No hubo cambios en el animal con nacedero (r = -0.1).
Géneros de protozoarios
| Cuadro 3:
Clasificación de los géneros de protozoos encontrados
en terneros Holstein suplementados con árboles
forrajeros |
|
| Género |
Orejero |
Cachimbo |
Nacedero |
|
| Entodinium
sp |
80% |
57% |
74% |
| Diplodinium
sp |
18% |
14% |
14% |
| Euplodinium
sp |
1% |
4% |
9% |
| Epidinium
ecaudatum |
0% |
5% |
2% |
| Isotricha
prostoma |
1% |
20% |
1% |
|
Expresados como porcentaje del
número total (promedios de todas las observaciones).
Predominó el género Entodinium en todos los animales que es
de esperarse, tomando en cuenta la naturaleza de la dieta básica
(Jouany 1988).
pH y amoníaco ruminal
El pH estaba en en el rango de 5.8 y 7.25, con promedios de
6.44±0.11, 6.8±0.10 y 6.7±0.13 para los animales que
recibieron nacedero, orejero y cachimbo respectivamente. Estos
valores se encuentran dentro del rango óptimo para los
protozoarios, el cual es de 5.5 a 8.0 (Coleman 1988).
| Cuadro 4:
Variación de los niveles del amoniaco |
|
| Dias |
Nacedero |
Cachimbo |
Orejero |
|
| 1 |
28.00 |
28.00 |
28.00 |
| 2 |
18.30 |
16.00 |
20.80 |
| 3 |
9.90 |
12.80 |
14.80 |
| 4 |
5.20 |
8.10 |
8.00 |
| 5 |
7.00 |
3.20 |
7.90 |
| 6 |
3.80 |
6.10 |
7.70 |
| 7 |
3.20 |
14.40 |
11.20 |
| 8 |
4.20 |
16.30 |
11.50 |
| 9 |
5.20 |
7.40 |
11.20 |
| 10 |
7.00 |
7.00 |
5.50 |
| 11 |
5.60 |
8.60 |
7.40 |
| 12 |
6.70 |
13.10 |
15.70 |
| 13 |
6.60 |
13.40 |
15.10 |
| 14 |
6.40 |
15.10 |
16.00 |
| 15 |
6.40 |
6.70 |
17.00 |
| 16 |
6.50 |
2.90 |
14.70 |
| |
|
|
|
| Promedio |
8.12 |
11.2 |
12.84 |
| Desv estandar
|
±6.3 |
±6.3 |
±5.9 |
|
Los niveles de amoníaco, en general son bajos, típicos de
animales en pastoreo, que no reciben suplementación de
nitrógeno fermentable. No hubo tendencias marcadas según el
período de muestreo.
Conclusiones
Los resultados de este ensayo preliminar no demostró ninguna
tendencia clara sobre el posible uso de los follajes arbóreos
como agentes para controlar los protozoarios en los rumiantes. La
baja población de estos organismos debido a la naturaleza de la
dieta básica, pudiera haber sido el factor limitante.
Normalmente, cuando hay efectos de la defaunación los animales
testigo tienen poblaciones de protozoarios del orden de 5-8 x 105
(ver Leng 1988). Otro factor que debe estudiarse es el efecto de
la cantidad de follaje y el tiempo necesario para lograr un
control eficaz de estos organismos.
Reconocimientos
Este trabajo se realizó con el apoyo de la Fundación
Internacional de Ciencia, según el "Research Grant
Agreement; B/1441-1".
Referencias
Bird S H 1988 Production from
ciliate-free ruminants. In: The Roles of Protozoa and Fungi in
Ruminant Digestion (Editors: J V Nolan, R A Leng y D I Demeyer).
Penambul Books:Armidale, Australia.
CIPAV 1987 Ajuste de los sistemas
pecuarios a los recursos tropicales. Suplemento Ganadero (Bogota,
Colombia) 7:1-72
Coleman G S 1988 Protozoal-bacterial
interaction in the rumen. In: The Roles of Protozoa and Fungi in
Ruminant Digestion (Editors: J V Nolan, R A Leng y D I Demeyer).
Penambul Books:Armidale, Australia
Demeyer D I, van Nevel C J and van de Voord
G 1981 The effects of defaunation on the growth of lambs fed
three urea containing diets. Archives fur Tierernahrung
32:595-604
Jouany J P 1988 Effects of diet on
populations of rumen protozoa in relation to fibre digestion. In:
The Roles of Protozoa and Fungi in Ruminant Digestion (Editors: J
V Nolan, R A Leng y D I Demeyer). Penambul Books:Armidale,
Australia
Leng R A 1988 The dynamics of protozoa
in the rumen. In: The Roles of Protozoa and Fungi in Ruminant
Digestion (Editors: J V Nolan, R A Leng y D I Demeyer). Penambul
Books:Armidale, Australia.